LAMP(loop-mediated isothermal amplification),即環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增法,是一種新型的核酸擴(kuò)增方法,其特點(diǎn)是針對(duì)靶基因的6個(gè)區(qū)域設(shè)計(jì)4種特異引物,在鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下,60-65℃恒溫?cái)U(kuò)增,15-60分鐘左右即可實(shí)現(xiàn)10^9~10^10倍的核酸擴(kuò)增,具有操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)、產(chǎn)物易檢測(cè)等特點(diǎn)。
在DNA合成時(shí),從脫氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸離子與反應(yīng)溶液中的鎂離子反應(yīng),產(chǎn)生大量焦磷酸鎂沉淀,呈現(xiàn)白色。因此,可以把渾濁度作為反應(yīng)的指標(biāo),只用肉眼觀察白色渾濁沉淀,就能鑒定擴(kuò)增與否,而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。由于環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)不需要PCR儀和昂貴的試劑,有著廣泛的應(yīng)用前景。